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細胞鐵離子試劑盒檢測范圍
更新時間:2022-03-10   點擊次數:717次

細胞鐵離子試劑盒檢測范圍


描述:鐵是人體必需的元素之一,對人體的新陳代謝和身體健康具有重要作用,血液中鐵的含量不足,就會造成缺鐵性貧血。鐵存在于人體所有的細胞內,各組織、器官包括各內分泌腺都含有鐵。肝臟、脾臟和肺組織內含量較為豐富。成人體內含鐵35克,大部分都以蛋白質復合物形式存在,極少部分以離子的形態存在。本試劑盒采用亞鐵嗪比色法可以定量細胞鐵離子,線性范圍5~300uM。產品包括標準品和空白對照,本試劑盒可進行100個樣品的檢測。


規格:100T


儲存:4℃保存 6個月有效


操作步驟:

1. 樣品準備(以24孔板為例):

將含鐵元素DMEM培養過的細胞用冷的PBS 2ml洗兩遍,將PBS吸棄(若不馬上檢測可將其凍存于-20℃)。200ul/孔裂解液裂解細胞,置于搖床裂解2h

2. 標準品的稀釋:用試劑盒提供的稀釋用液將3mM 的標準品母液稀釋為:300 uM150uM75uM37.5uM18.75uM9.38uM4.69uM。注意倍比稀釋并設置0濃度對照反應管。

3. 將緩沖液與4.5%KMo4溶液按1:1混勻,稱為混液A

5. 混勻,60℃ 孵育1h

6. 冷卻至室溫,將管蓋與管壁上的液滴離心入管底。

7. 加入30ul 鐵離子檢測劑,混勻,室溫孵育,30min

8. 200ul 96孔板,在550nm測定吸光度。如果不能測定550nm,也可以在540nm~580nm范圍內檢測。

9. 繪制標準曲線并計算鐵離子濃度。


說明:

1. 本試劑盒不受錳離子、鎂離子、鎳離子和鋅離子等的干擾。
2. 操作過程中,樣品與試劑等避免與鐵器接觸,以防污染。

3. 所測樣本的值高于標準曲線的上限,應稀釋樣品后重新測定。

4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作,檢測試劑有腐蝕性,請小心操作,若不慎沾到皮膚上請馬上用清水沖洗干凈。

5. 該試劑盒僅供科學研究使用。




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